KeyTec® TR-FRET TKs kinase kit

KeyTec® TR-FRET TKs kinase 检测试剂盒可检测激酶相对活性水平。试剂盒中使用多种酪氨酸激酶特异性底物和一组通用检测试剂来测定激酶的相对活性。酪氨酸激酶（Tyrosine kinases, TKs）家族成员众多，本试剂盒可兼容 60 种以上酪氨酸激酶的活性测定（数据持续更新中，详情访问官网或咨询客服）。本试剂盒中使用了经过优化设计的生物素偶联多肽作为底物，可与 KeyTec® TR-FRET HX*1偶联的链霉亲和素（Streptavidin - HX）结合；配合偶联了 KeyTec® TR-FRET Solar Eu*2的 phospho-Tyr 特异性抗体一起使用，即可通过检测被磷酸化底物的水平来评估酶的活性。 本试剂盒是运用 KeyTec® TR-FRET 技术开发的夹心型免疫分析方法，具有简单快速、特异性高、灵敏度高、重复性好等特点。基本步骤和原理如下图（图 1）所示。第一步，酶反应阶段：在含有待测激酶和 ATP 的酶反应缓冲体系中，激酶将特异性底物磷酸化。第二步，检测阶段：加入含有 EDTA（终止酶反应）的特异性抗体与 Streptavidin - HX 即可检测磷酸化底物的水平。特异性识别磷酸化位点的抗体与磷酸化的底物结合、Streptavidin - HX 与底物末端的生物素结合之后，从而使 TR-FRET 供体与受体相互靠近，在外部光源的激发下发生能量共振转移，产生 TR-FRET 信号；TR-FRET 信号强度与磷酸化底物的量成正比。